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肾上腺皮质酮检测试剂盒(酶联免疫法)

英文名称:Corticosterone ELA

   生产厂商:艾狄斯

【简介】

本产品仅供科研使用。

IDS公司的肾上腺皮质酮酶免试剂盒是用竞争法酶联免疫分析法(EIA)定量检测大、小鼠血清/血浆中的皮质酮


【概要说明】

肾上腺皮质酮(4-孕烯醇酮-11,12-二醇-3,20-二酮)是由肾上腺皮质分泌的,在大、小鼠体内发现的主要糖皮质激素。循环中大部分肾上腺皮质酮由皮质类固醇结合球蛋白运载。大、小鼠的皮质酮水平与人类皮质中的数量状态相类似,可作为肾上腺功能的指标使用。我们能从促肾上腺皮质激素的释放(促进分泌)和通过地赛米松或垂体切除术(抑制分泌)中观察其反应。在循环中,压力也同样扮演了一个非常重要的角色。压力情形将导致肾上腺皮质酮水平迅速增加,这些压力情形包括温度的改变、实验的刺激或非常规事件的出现。

 

【方法描述】

IDS公司的肾上腺皮质酮酶免试剂盒采用竞争法酶联免疫分析法,该方法利用多克隆抗体包被至聚苯乙烯微量板内表层。定标、质控和稀释样本与标上肾上腺皮质酮的酶(辣根过氧化物酶)在包被抗体微量孔中2-8°C下一同孵育过夜。清洗微量孔并用发色底物(TMB)使其生成颜色。停止反应混合物并在微量板读数仪上读取其吸光度,颜色的强度与样本中肾上腺皮质酮的的浓度成反比。


【样本收集和保存】

该检测应使用血清或血浆样本(EDTA、肝素、柠檬酸盐)。样本在收集后应立即进行离心分离。如需长期保存,应储存在-20°C。避免反复冻溶样本。


操作简介


样本稀释

30 μL的样本

270 μL的样本稀释液SAMPDIL旋涡混匀

 

检测

加入100 μL标准液CAL 质控液CTRL或稀释后的样本至抗体包被的微量板中MICROPLAT .

加入100 μL的酶结合物溶液

孵育:16-24小时@ 2-8°C

洗板

加入200 μL TMB底物SUBS

孵育:30分钟 @ 18-25°C.

 加入100 μL终止液HCL

                                                                     读板 @ 405nm.



参考文献

1.     Corker C.S. Karolinska Symposia on Research Methods in Reproductive Endocrinology : Steroid Assay by Protein Binding. E. Diczfalusy, ed., p 153 (1970).

2.     Keith L. D., Winslow J. R. and Reynolds R. W. Steroids, 31: 523 (1978).

3.     Shimizu K., Amagaya S. and Ogihara Y. : Analysis of Corticosterone in the serum of mice and rats, using high performance liquid chromatography. J. Chromatography, 272: 170

4.      Vining R.F., James D. E., Bennett S. P. and Kraegen E. W. Steroids, 38: 297 (1981)

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