阿狄科®依那西普单抗药物浓度检测试剂盒（酶联免疫法）
IDKmonitor® Etanercept drug level ELISA

货号	K 9646
规格	96人份/盒
孵育时间	1h/1h/10-20min
样本类型	血清、EDTA血浆
样本量	10μl
校准品	4.15-225ng/ml
方法学	酶联免疫法
生产商	德国IMMUNDIAGNOSTIK公司

预期用途
用于体外定量测定人血清和EDTA血浆中游离治疗性TNFα抗体依那西普（如恩利®）。仅供科研使用。

背景知识
肿瘤坏死因子α(TNFα)属于促炎细胞因子，可促进和维持炎症反应。它由巨噬细胞和T细胞产生，在急性和慢性炎症中都起着核心作用。因此，克罗恩病、溃疡性结肠炎、类风湿性关节炎或银屑病等慢性炎症性疾病越来越多地使用抗TNFα抗体进行治疗，直接针对潜在的炎症过程[5]。
抗TNFα治疗的临床疗效通常与治疗性抗体的谷浓度相关，即下一次应用抗TNFα抗体之前的药物浓度。有几个因素影响谷浓度，其中包括抗TNFα拮抗剂输注的剂量和频率、疾病活动度、个体药代动力学和免疫反应（形成抗药物抗体，ADA）[1,13]。
用于测定依那西普药物浓度（如恩利®）的阿狄科®依那西普单抗药物浓度检测试剂盒（酶联免疫法）可定量测定EDTA血浆和血清中的游离依那西普。结合抗依那西普的ADA检测，阿狄科®依那西普单抗药物浓度检测试剂盒（酶联免疫法）为主治医师提供了早期监测和优化治疗的机会。

主要组成成分

货号	标签	成分	数量
K 9646	PLATE	预包被微孔板	12 x 8孔
K 0001.C.100	WASHBUF	10x浓缩洗液	2 x 100ml
K 9646	CONJ	浓缩结合物，过氧化物酶标记	1 x 200μl
K 9646	STD	校准品，冻干粉(0; 4.15; 8.3; 25; 75; 225 ng/ml)	2 x 6瓶
K 9646	CTRL 1	质控品1，冻干粉（范围详见规格表）	2 x 1瓶
K 9646	CTRL 2	质控品1，冻干粉（范围详见规格表）	2 x 1瓶
K 0004.100	SAMPLEBUF	样本稀释缓冲液，即用型	2 x 100ml
K 0002.15	SUB	底物（四甲基联苯胺溶液），即用型	1 x 15ml
K 0003.15	STOP	终止液，即用型	1 x 15ml

储存条件及有效期
本产品在2-8℃下保存可稳定至所标示的有效期。
工作洗液配制后须储存于密封容器中，在2-8℃下可保存1个月。
冻干的校准品和质控品在2-8℃下保存，可稳定至所标示的有效期。复溶后的校准品和质控品置于-20℃保存，可保存三个月，应避免反复冻融。
结合物稀释后不稳定，无法保存，须现配现用。
生产日期及失效日期见试剂盒标签。

适用仪器
适用于具有450nm、620nm波长的所有全自动、半自动酶标仪。

样本要求
样本保存
新鲜采集的EDTA血浆或血清在室温（15-30℃）下可保存7天，置于-20℃下可保存6个月[6]。
已稀释的EDTA血浆或血清样本在2-8℃可保存7天，在-20℃下至少可保存4周。应避免反复冻融。
EDTA血浆和血清
实验前，EDTA血浆或血清样本必须按1:50的比例稀释（例如：10μl样本 + 490μl样本缓冲液），混匀。
如复孔检测样本，每孔移取2 x 100μl至待测孔中。

灵敏度分析
以下值是根据校准品的浓度估算的，没有考虑可能使用的样本稀释因子。
（空白限）LoB= 1.438ng/ml
（检测限）LoD= 2.570ng/ml
（定量限）LoQ= 2.841ng/ml
根据CLSI指南EP-17-A2进行评估。LoQ的特定精度目标是20% CV。
（更多性能指标详见产品说明书）

参考文献
1. Afif W, Loftus EJ, Faubion W, et al. Clinical utility of measuring Etanercept and human anti-chimeric antibody concentrations in patients with inflammatory bowel disease. American Journal of Gastroenterology. 2010;105(5):1133–9.
2. Beglinger C, Binek J, Braegger C, Michetti P, Rogler G, Sauter B, Seibold F, Straumann A (2008) Monotherapie versus Kombinationstherapie mit Immunmodulatoren. TMI 1:32-34
3. Bender NK, Heilig CE, Dröll B, Wohlgemuth J, Armbruster FP, Heilig B (2007) Immunogenicity, efficacy and adverse events of adalimumab in RA patients. Rheumatol Int. Jan;27(3):269-74
4. Bendtzen K, Geborek P, Svenson M, Larsson L, Kapetanovic MC, Saxne T (2006) Individualized monitoring of drug bioavailability and immunogenicity in rheumatoid arthritis patients treated with the tumor necrosis factor alpha inhibitor Etanercept. Arthritis Rheum. Dec;54(12):3782-9
5. Bradley JR. (2008) TNF-mediated inflammatory disease. Journal of Pathology. 214:149–160.
6. St Clair EW, Wagner CL, Fasanmade AA, Wang B, Schaible T, Kavanaugh A, Keystone EC (2002) The relationship of serum Etanercept concentrations to clinical improvement in rheumatoid arthritis: results from ATTRACT, a multicenter, randomized, double-blind, placebo-controlled trial. Arthritis Rheum. Jun;46(6):1451-9
7. Chang JT, Lichtenstein GR (2006) Drug insight: antagonists of tumor-necrosis factor-alpha in the treatment of inflammatory bowel disease. Nat Clin Pract Gastroenterol Hepatol. Apr;3(4):220-8. Review
8. Colombel JF, Loftus EV Jr, Tremaine WJ, Egan LJ, Harmsen WS, Schleck CD, Zinsmeister AR, Sandborn WJ (2004) The safety profile of Etanercept in patients with Crohn‘s disease: the Mayo clinic experience in 500 patients. Gastroenterology. Jan;126(1):19-31
9. Cominelli F (2004) Cytokine-based therapies for Crohn‘s disease--new paradigms. N Engl J Med. Nov 11;351(20):2045-8.
10. Cornillie F, Shealy D, D‘Haens G, Geboes K, Van Assche G, Ceuppens J, Wagner C, Schaible T, Plevy SE, Targan SR, Rutgeerts P (2001) Etanercept induces potent anti-inflammatory and local immunomodulatory activity but no systemic immune suppression in patients with Crohn‘s disease. Aliment Pharmacol Ther. Apr;15(4):463-73
11. Maser EA, Villela R, Silverberg MS, Greenberg GR (2006) Association of trough serum Etanercept to clinical outcome after scheduled maintenance treatment for Crohn‘s disease. Clin Gastroenterol Hepatol. Oct;4(10):1248-54
12. Rutgeerts P, Van Assche G, Vermeire S (2004) Optimizing anti-TNF treatment in inflammatory bowel disease. Gastroenterology. May;126(6):1593-610. Review
13. Vande Casteele N, Gils A. Pharmacokinetics of anti-TNF monoclonal antibodies in inflammatory bowel disease: Adding value to current practice. Journal of clinical pharmacology. 2015;55 Suppl 3:S39–50. doi:10.1002/jcph.374.
14. Perry, M., Bewshea, C., Brown, R., So, K., Ahmad, T., & McDonald, T. (2015). Etanercept and adalimumab are stable in whole blood clotted samples for seven days at room temperature. Annals of Clinical Biochemistry. Epub ahead of print.