阿狄科®英夫利昔单抗药物浓度检测试剂盒（酶联免疫法）
IDKmonitor® Infliximab drug level ELISA

货号	K 9655
规格	96人份/盒
孵育时间	1h/1h/10-20min
样本类型	血清、EDTA血浆
样本量	10μl
校准品	4.15-225ng/ml
方法学	酶联免疫法
生产商	德国IMMUNDIAGNOSTIK公司

预期用途
用于体外定量测定人血清和EDTA血浆中游离治疗性抗体英夫利昔单抗（如类克®、Remsima®、Inflectra®）。仅供科研使用。

背景知识
肿瘤坏死因子α(TNFα)属于促炎细胞因子，可促进和维持炎症反应。它由巨噬细胞和T细胞产生，在急性和慢性炎症中都起着核心作用。因此，克罗恩病、溃疡性结肠炎、类风湿性关节炎或银屑病等慢性炎症性疾病越来越多地使用抗TNFα抗体进行治疗，直接针对潜在的炎症过程[5]。
抗TNFα治疗的临床疗效通常与治疗性抗体的谷浓度相关，即下一次应用抗TNFα抗体之前的药物浓度。有几个因素影响谷浓度，其中包括抗TNFα拮抗剂输注的剂量和频率、疾病活动度、个体药代动力学和免疫反应（形成抗药物抗体，ADA）[1,13]。
用于测定英夫利昔单抗药物浓度的阿狄科®英夫利昔单抗药物浓度检测试剂盒（酶联免疫法）可定量测定EDTA血浆和血清中的游离英夫利昔单抗。结合抗英夫利昔单抗的ADA检测，阿狄科®英夫利昔单抗药物浓度检测试剂盒（酶联免疫法）为主治医师提供了早期监测和优化治疗的机会。

主要组成成分

货号	标签	成分	数量
K 9655	PLATE	预包被微孔板	12 x 8孔
K 0001.C.100	WASHBUF	10x浓缩洗液	2 x 100ml
K 9655	CONJ	浓缩结合物，过氧化物酶标记	1 x 200μl
K 9655	STD	校准品，即用型（0; 4.15; 8.3; 25; 75; 225ng/ml）	1 x 6瓶
K 9655	CTRL 1	质控品，即用型（范围详见规格表）	1 x 1瓶
K 9655	CTRL 2	质控品，即用型（范围详见规格表）	1 x 1瓶
K 0004.100	SAMPLEBUF	样本稀释缓冲液，即用型	2 x 100ml
K 0002.15	SUB	底物（四甲基联苯胺溶液），即用型	1 x 15ml
K 0003.15	STOP	终止液，即用型	1 x 15ml

储存条件及有效期
本产品在2-8℃下保存可稳定至所标示的有效期。
工作洗液配制后须储存于密封容器中，在2-8℃下可保存1个月。
结合物稀释后不稳定，无法保存，须现配现用。
生产日期及失效日期见试剂盒标签。

适用仪器
适用于具有450nm、620nm波长的所有全自动、半自动酶标仪。

样本要求
样本保存
新鲜采集的EDTA血浆或血清在室温（15-30℃）或2-8℃下可保存7天，若须长期保存，请置于-20℃下保存[14]。
已稀释的EDTA血浆或血清样本在室温下可保存7天，在2-8℃可保存15天，在-20℃至少可保存7周。应避免反复冻融，冻融次数不超过3次。
EDTA血浆和血清
实验前，EDTA血浆或血清样本必须按1:200的比例稀释（例如：10μl样本 + 1990μl样本稀释缓冲液），混匀。
如复孔检测样本，每孔移取2 x 100μl至待测孔中。

灵敏度分析
以下值是根据校准品的浓度估算的，没有考虑可能使用的样本稀释因子。
（空白限）LoB= 1.998ng/ml
（检测限）LoD= 2.682ng/ml
（定量限）LoQ= 2.682ng/ml
根据CLSI指南EP-17-A2进行评估。LoQ的特定精度目标是20% CV。
（更多性能指标详见产品说明书）

参考文献
1. Afif W, Loftus E V, Faubion WA, Kane S V, Bruining DH, Hanson KA, et al. Clinical utility of measuring infliximab and human anti-chimeric antibody concentrations in patients with inflammatory bowel disease. The American journal of gastroenterology. 2010/02/11. 2010 May;105(5):1133–9.
2. Beglinger C, Binek J, Braegger C, Michetti P, Rogler G, Sauter B, et al. InfliximabMonotherapie versus Kombinationstherapie mit Immunmodulatoren. The medical journal. 2008;1:32–4.
3. Bender NK, Heilig CE, Dröll B, Wohlgemuth J, Armbruster F-P, Heilig B. Immunogenicity, efficacy and adverse events of adalimumab in RA patients. Rheumatology international. 2006/09/29. 2007 Jan 11;27(3):269–74.
4. Bendtzen K, Geborek P, Svenson M, Larsson L, Kapetanovic MC, Saxne T. Individualized monitoring of drug bioavailability and immunogenicity in rheumatoid arthritis patients treated with the tumor necrosis factor alpha inhibitor infliximab. Arthritis and rheumatism. 2006 Dec;54(12):3782–9.
5. Bradley JR. TNF-mediated inflammatory disease. The Journal of pathology. 2008 Jan;214(2):149–60.
6. St Clair EW, Wagner CL, Fasanmade A a, Wang B, Schaible T, Kavanaugh A, et al. The relationship of serum infliximab concentrations to clinical improvement in rheumatoid arthritis: results from ATTRACT, a multicenter, randomized, doubleblind, placebo-controlled trial. Arthritis and rheumatism. 2002 Jun;46(6):1451–9.
7. Chang JT, Lichtenstein GR. Drug insight: antagonists of tumor-necrosis factor-alpha in the treatment of inflammatory bowel disease. Nature clinical practice Gastroenterology & hepatology. 2006 Apr;3(4):220–8.
8. Colombel J-F, Loftus E V, Tremaine WJ, Egan LJ, Harmsen WS, Schleck CD, et al. The safety profile of infliximab in patients with Crohn’s disease: the Mayo clinic experience in 500 patients. Gastroenterology. 2004 Jan;126(1):19–31.
9. Cominelli F. Cytokine-based therapies for Crohn’s disease--new paradigms. The New England journal of medicine. 2004 Nov 11;351(20):2045–8.
10. Cornillie F, Shealy D, D’Haens G, Geboes K, Van Assche G, Ceuppens J, et al. Infliximab induces potent anti-inflammatory and local immunomodulatory activity Manual IDKmonitor® infliximab drug level 28 but no systemic immune suppression in patients with Crohn’s disease. Alimentary pharmacology & therapeutics. 2001 Apr;15(4):463–73.
11. Maser E a, Villela R, Silverberg MS, Greenberg GR. Association of trough serum infliximab to clinical outcome after scheduled maintenance treatment for Crohn’s disease. Clinical gastroenterology and hepatology : the official clinical practice journal of the American Gastroenterological Association. 2006 Oct;4(10):1248–54.
12. Rutgeerts P, Van Assche G, Vermeire S. Optimizing anti-TNF treatment in inflammatory bowel disease. Gastroenterology. 2004 May;126(6):1593–610.
13. Vande Casteele N, Gils A. Pharmacokinetics of anti-TNF monoclonal antibodies in inflammatory bowel disease: Adding value to current practice. Journal of clinical pharmacology. 2015 Mar;55 Suppl 3(May 2014):S39-50.
14. Perry M, Bewshea C, Brown R, So K, Ahmad T, McDonald T. Infliximab and adalimumab are stable in whole blood clotted samples for seven days at room temperature. Annals of clinical biochemistry. 2015 Nov;52(Pt 6):672–4.
15. Perry, M., Bewshea, C., Brown, R., So, K., Ahmad, T., & McDonald, T. (2015). Infliximab and adalimumab are stable in whole blood clotted samples for seven days at room temperature. Annals of Clinical Biochemistry. Epub ahead of print.